Домой

Весь курс предусматривает 36 занятий, из них 23 занятия помещены в первой части пособия и 13 во второй. Теоретическая часть включает перечень учебных вопросов, рассматриваемых по данной теме, которые должен знать студент




НазваниеВесь курс предусматривает 36 занятий, из них 23 занятия помещены в первой части пособия и 13 во второй. Теоретическая часть включает перечень учебных вопросов, рассматриваемых по данной теме, которые должен знать студент
страница6/9
Дата03.04.2013
Размер1.29 Mb.
ТипДокументы
Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф.
Определение общих липидов в сыворотке крови сульфофосфованилиновым методом
Ход работы.
Норма. Содержание общих липидов в сыворотке крови здоровых людей составляет 4–
Количественное определение холестерина в сыворотке крови методом Илька
ВНИМАНИЕ! Соблюдать меры безопасности при работе с серной кислотой и уксусным ангидридом.
Норма. Содержание общего ХС в сыворотке крови здорового человека составляет 3,7–6,5 ммоль/л, или 150–250 мг%. Клинико-диагностич
Биохимия белков и нуклеиновых кислот
Подобные работы:
1   2   3   4   5   6   7   8   9

Рекомендуемая литература

Основная

  1. Материал лекций.

  2. ^ Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. М.: Медицина, 1990. С. 276–291; 1998. С. 363–372, 574–576.

  3. Николаев А. Я. Биологическая химия. М.: Высшая школа, 1989. С. 263–266, 270–273, 280–281.

Дополнительная

  1. Филиппович Ю. Б. Основы биохимии. М.: Высшая школа, 1993. С. 363–380.

  2. Марри Р. и др. Биохимия человека. М.: Мир, 1993. Т. 1. С. 151–164, 256–266.

  3. Руководство по клинической и лабораторной диагностике. Т. 3. Клиническая биохимия. Киев: Вища школа, 1986. С. 96–109.

  4. Методическое пособие по метаболизму липопротеидов. Гомель, 1996.

  5. Албертс Б. и др., Молекулярная биология клетки. М.: Мир, 1994. Т. 1. С. 349–429.



Занятие 14

Тканевой обмен липидов


Цель занятия: изучить главные метаболические пути основных классов липидов (ТГ, ФЛ, жирных кислот, кетоновых тел, ХС). Научиться определять содержание общих липидов крови.

Исходный уровень знаний и навыков


Студент должен знать:

  1. Характеристику основных классов ЛП.

  2. Метаболизм ЛП в норме.

  3. Пути передачи гормонального сигнала на клетку (аденилатциклазный, инозитолтрифосфатный).

  4. ЦТК, его энергетический баланс.

  5. Структуру и функцию полиферментных комплексов (на примере пируват-ДГ).


Студент должен уметь:

  1. Проводить исследование на фотоэлектроколориметре.


Структура занятия


  1. Теоретическая часть

    1. Механизм мобилизации жира (роль гормонов, цАМФ и Ca2+).

    2. Свойства и физиологическая роль свободных жирных кислот (СЖК). Транспорт СЖК в крови.

    3. Окисление ТГ в тканях, окисление глицерина, его энергетический баланс.

    4. Этапы -окисления насыщенных жирных кислот. Механизм активации и транспорта жирных кислот через митохондриальную мембрану. Роль карнитина. Особенности -окисления ненасыщенных жирных кислот и жирных кислот с нечетным числом атомов. Энергетический баланс окисления C16, C15, C18:2.

    5. Энергетический баланс окисления тристеарата. Физиологическая роль СЖК при стрессе.

    6. Обмен ацетил-КоА (пути образования и утилизации).

    7. Кетоновые тела – биосинтез, утилизация, физиологическая роль.




  1. Практическая часть

    1. Решение задач.

    2. Лабораторная работа.


Задачи

1 Жирная кислота C15 будет вступать в ЦТК в виде:

а) цитрата; б) сукцинил КоА; в) ацетил КоА; г) -кетоглутарата; д) сукцината; е) малонил КоА?

2 Мембрана митохондрий проницаема для:

а) ацил-АПБ; б) ацил-КоА; в) малонил-КоА; г) ацетил-КоА; д) ни одного из названных соединений; е) всех названных соединений?

3 Гормончувствительная липаза обеспечивает:

а) гидролиз эфирных связей в гормонах;

б) адреналин-зависимый гидролиз пищевых липидов;

в) мобилизацию ТГ жировой ткани;

г) гидролиз ТГ в печени;

д) гидролиз ТГ в мозге?

4 Главным энергетическим субстратом для мозга в нормальных условиях является:

а) глюкоза; б) аминокислоты; в) кетоновые тела; г) жирные кислоты; д) молочная кислота; е) ТГ?

5 При голодании окисление СЖК или кетоновых тел приводит к торможению гликолиза в мышцах, потому что:

а) ацетил-КоА подавляет активность пируват-ДГ;

б)увеличение отношения АТФ/АДФ лимитирует гексокиназу;

в) гипоинсулинемия ограничивает потребление глюкозы мышцей;

г) увеличение отношения NADH/NAD+ лимитирует 3-ФГА-ДГ;

д) жирные кислоты обладают контринсулярным эффектом;

е) активируется ГНГ?

6 Кофакторы, общие как для -окисления СЖК, так и для аэробного гликолиза, включают:

а) витамин B12; б) NAD+; в) АДФ; г) HS-KoA; д) аскорбат; е) биотин?

7 Мобилизация липидов из депо происходит при:

а) уменьшении концентрации цАМФ;

б) увеличении концентрации цАМФ;

в) увеличении концентрации инсулина;

г) уменьшении концентрации инсулина;

д) увеличении концентрации адреналина;

е) увеличении концентрации ионизированного Ca2+ в крови?

8 Для транспорта CH3CO-SКоА из митохондрии в цитоплазму при биосинтезе пальмитиновой кислоты необходимо наличие:

а) карнитин-ацилтрансферазы; б) ацетил-КоА-карбоксилазы; в) КоА-гидролазы; г) АТФ-цитратлиазы; д) цитратсинтетазы; е) малонил КоА?

9 Что является ключевым метаболитом при биосинтезе кетоновых тел в печени?

а) ацетил-КоА; б) малонил-КоА; в) ацетоацетил-КоА; г) -окси-метилглютарил-КоА; д) цитрат; е) NADH?

10 Какие из следующих ферментов необходимы для превращения ПВК в ацетил-КоА:

а) пируват ДГ; б) цитратсинтетаза; в) пируваткарбоксилаза; г) ФЕПКК; д) АТФ-цитрат-лиаза; е) дигидролипоат ДГ?


Лабораторная работа. ^ Определение общих липидов в сыворотке крови сульфофосфованилиновым методом


Принцип метода. Продукты распада ненасыщенных липидов образуют с реактивом, состоящим из серной, ортофосфорной кислот и ванилина, соединение, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию общих липидов в сыворотке крови.

ВНИМАНИЕ! Соблюдать меры безопасности при работе с концентрированной серной кислотой и кипячением на водяной бане. (Проводится дополнительный инструктаж по технике безопасности.)

^ Ход работы. Готовят опытную и контрольную пробы по схеме:

Проба

H2SO4

Сыворотка крови

Вода дистиллированная

Опытная

5 мл

0,1 мл

-

Контрольная

5 мл

-

0,1 мл


Пробы тщательно перемешивают и помещают в кипящую водяную баню на 10 мин. Затем охлаждают водопроводной водой до комнатной температуры. Отбирают пипеткой из опытной и контрольной проб по 0,2 мл гидролизата и переносят в сухие пробирки. Добавляют в каждую пробирку по 3 мл фосфорно-ванилиновой смеси, тщательно перемешивают и оставляют стоять 45 мин при комнатной температуре.

Интенсивность окраски измеряют на фотометре против контроля при зеленом светофильтре (длина волны 500–560 нм) в кювете шириной 5 мм. Расчет производят по калибровочному графику. Результат выражают в миллиграммах на 100 мл сыворотки крови (мг%) или граммах на литр (г/л).

^ Норма. Содержание общих липидов в сыворотке крови здоровых людей составляет 48 г/л, или 400–800 мг%.

Клинико-диагностическое значение. Как физиологическое явление гиперлипемия наступает через 1–4 часа после приема пищи.

Патологическая гиперлипемия наблюдается при сахарном диабете (иногда до 10–20 г/л), при липоидном нефрозе (до 50 г/л), билиарном циррозе печени, остром гепатите (особенно в период желтухи), остром или хроническом нефрите.

Содержание общих липидов в крови возрастает также при эссенциальной гиперлипидемии, ожирении, атеросклерозе (часто у больных ИБС), гипотиреозе, панкреатите, злоупотреблении алкоголем.

Выводы. Записать полученный результат и дать его клинико-диагности­ческую оценку.

Рекомендуемая литература

Основная

  1. Материал лекций.

  2. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. М.: Медицина, 1990, С. 292–300; 1998. С. 370–381.

  3. Николаев А. Я. Биологическая химия. М.: Высшая школа, 1989. С. 263–266, 270–273, 280–281.

Дополнительная

  1. Филиппович Ю. Б. Основы биохимии. М.: Высшая школа, 1993. С. 380–402.

  2. Марри Р. и др. Биохимия человека. М.: Мир, 1993. Т. 1. С. 274–297.

  3. Климов А. Н., Никульчева Н. Г. Липиды, липопротеиды и атеросклероз. СПб, 1995.

  4. Рецепторы ЛПНП в развитии атеросклеротических изменений сосудов // В мире науки. 1988. № 12.



Занятие 15

Биосинтез липидов. Регуляция и патология липидного обмена


Цель занятия: изучить основные типы и механизмы нарушений липидного обмена. Научиться определять уровень общего холестерина в крови.


Исходный уровень знаний и навыков


Студент должен знать:

  1. Механизмы регуляции углеводного обмена.

  2. Механизмы нарушения обмена веществ при сахарном диабете.

  3. Строение и биологическую роль желчных кислот.

  4. Характеристику основных классов ЛП.

  5. Метаболизм ЛП в норме.

  6. Пути передачи гормонального сигнала на клетку (аденилатциклазный, инозитолтрифосфатный).

  7. ЦТК, его энергетический баланс.

  8. Структуру и функцию полиферментных комплексов (на примере пируват-ДГ).


Студент должен уметь:

  1. Проводить исследование на фотоэлектроколориметре.


Структура занятия

  1. Теоретическая часть

    1. Биосинтез насыщенных жирных кислот. Роль ацилпереносящего белка (АПБ), пантотеновой кислоты, биотина, NADPH + H+ и ферментов. Источники ацетил-КоА для биосинтеза жирных кислот (ЖК). Регуляция биосинтеза ЖК.

    2. Биосинтез триглицеридов (ТГ) и фосфатидов.

    3. Биосинтез холестерина, его регуляция, биологическая роль холестерина. Пул холестерина в клетке, его регуляция.

    4. Механизм регуляции липидного обмена. Гормоны, регулирующие липолиз и липогенез. Интеграция липидного и углеводного обменов.

    5. Жироуглеводный цикл Рэндла. Цикл триглицериды – жирные кислоты. Их механизмы и физиологическое значение. Взаимоотношения кетоновых тел, СЖК и глюкозы.

    6. Нарушение переваривания и всасывания липидов, его проявления.

    7. Жировая инфильтрация и дегенерация печени – механизмы развития и профилактика.

    8. Ожирение – виды, механизмы развития и осложнения.

    9. Дислипопротеидемии. Классификация по Фридриксону, биохимическая и клинико-диагностическая характеристика основных групп.

    10. Липидозы – наследственные нарушения липидного обмена.

    11. Перекисное окисление липидов мембран. Механизм возникновения. Реакции, метаболиты. Биологическое значение в норме и при патологии.

    12. Антиоксидантная защита (см. тему «Биологическое окисление»).




  1. Практическая часть

    1. Решение задач

    2. Лабораторная работа.


Задачи

1 Кетоз является состоянием, когда в крови повышен уровень:

а) ацетил КоА; б) ацетоацетил-КоА; в) бета-оксибутирата; г) лактата; д) ацетона; е) ацетоацетата?

2 Ацетил-КоА карбоксилаза:

а) активируется цитратом; б) является лиазой; в) ограничивает скорость окисления жирных кислот; г) содержит биотин; д) является лигазой; е) является трансферазой?

3 Ацетил КоА карбоксилаза ингибируется:

а) цитратом; б) карнитином; в) авидином; г) лактальбумином; д) цианидом; е) NADH?

4 Какие кофакторы являются общими для бета-окисления и биосинтеза ЖК:

а) FAD; б) NAD+; в) NADP+; г) HS-KoA; д) биотин; е) карнитин?

5 Биосинтез ТГ высокоактивен:

а) в печени; б) мозге; в) жировой ткани; г) мышце; д) энтероцитах; е) эритроцитах?

6 При утилизации избытка глюкозы активируется биосинтез СЖК, потому что возрастает содержание:

а) ацетил-КоА; б) NADH+; в) NADPH+; г) кетоновых тел; д) гликогена; е) инсулина?


Лабораторная работа. ^ Количественное определение холестерина в сыворотке крови методом Илька


Принцип метода. Метод основан на том, что ХС в присутствии уксусного ангидрида и смеси уксусной и серной кислот (реактива Илька) образует окрашенные продукты, интенсивность окраски которых пропорциональна концентрации и определяется колориметрически.

^ ВНИМАНИЕ! Соблюдать меры безопасности при работе с серной кислотой и уксусным ангидридом.

Ход работы. В сухую пробирку (!) (присутствие следов воды мешает развитию окраски) вносят 2 мл реактива Илька и 0,1 мл негемолизированной сыворотки. Сыворотку добавляют медленно, так, чтобы она стекала по стенке пробирки.

Пробирку энергично встряхивают 10–12 раз и помещают в термостат при температуре 37 C° на 20 мин.

В качестве контрольной пробы используют 2 мл дистиллированной воды.

Окраску растворов измеряют на фотометре против контроля с красным светофильтром (длина волны 630–690 нм), в кювете шириной 5 мм. Содержание ХС в пробе определяют по калибровочной кривой.

^ Норма. Содержание общего ХС в сыворотке крови здорового человека составляет 3,7–6,5 ммоль/л, или 150–250 мг%.

Клинико-диагностическое значение. Увеличение содержания ХС в плазме крови – гиперхолестеринемия – наблюдается при избыточном потреблении продуктов, богатых холестерином, механической (обтурационной) желтухе, нефрите, микседеме (гипотиреоз), диабете, атеросклерозе, сифилисе, менингитах, некоторых заболеваниях печени, а также при наследственных гиперхолестеринемиях.

Снижение содержания ХС в плазме (гипохолестеринемия) отмечается при голодании, анемии, туберкулезе, острых панкреатитах, паренхиматозной желтухе, лихорадочных состояниях, острых инфекционных заболеваниях, хронической сердечной недостаточности, хронической пневмонии, гипертиреозе, раковой кахексии и др.

Выводы. Записать полученный результат и дать его клинико-диагности­ческую оценку.

Рекомендуемая литература

Основная

  1. Материал лекций.

  2. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. М.: Медицина, 1990. С. 292–291; 1998. С. 381–401, 574–577, 314–316.

  3. Николаев А. Я. Биологическая химия. М.: Высшая школа, 1989. С. 270–273, 280–281, 263–266.

Дополнительная

  1. Марри Р. и др. Биохимия человека. М.: Мир, 1993. Т. 1. С. 274–297.

  2. Филиппович Ю. Б. Основы биохимии. М.: Высшая школа, 1993. С. 380–402.

  3. Климов А. Н., Никульчева Н. Г. Липиды, липопротеиды и атеросклероз. СПб, 1995.

  4. Рецепторы ЛПНП в развитии атеросклеротических изменений сосудов // В мире науки, 1988. № 12.

  5. Лопухин Ю. М., Арчаков А. И. Холестериноз. М.: Медицина, 1983.



Занятие 16

Контрольное по разделу "Биохимия липидов"


Цель занятия: контроль усвоения вопросов пройденного раздела “Биохимия липидов”.


Контрольные вопросы

  1. Классификация липидов. Строение ТГ, ФЛ, ХС. Биологическое значение отдельных классов.

  2. Особенности строения ФЛ. Роль в построении мембран, их биологическое значение.

  3. Переваривание и всасывание липидов в ЖКТ.

  4. Строение и биологическая роль желчных кислот.

  5. Механизм эмульгирования липидов.

  6. Механизм активации липазы.

  7. Особенности переваривания липидов у детей.

  8. Строение, состав и характеристика липопротеидов.

  9. Метаболизм липопротеидов, схема образования и транспорта липопротеидных частиц.

  10. Роль рецептора ЛПНП в развитии гиперхолестеринемии. Механизм захвата ЛПНП клеткой.

  11. Формирование атеросклеротических изменений сосудистой стенки. Пенистые клетки.

  12. Механизм мобилизации жира. Роль гормонов, аденилатциклазы, инозитолдифосфата.

  13. Физиологическая роль жирных кислот.

  14. Механизм всасывания и мембранного транспорта жирных кислот в митохондрии. Роль карнитина.

  15. Бета-окисление насыщенных жирных кислот с четным числом атомов углерода. Реакции, ферменты, энергетический баланс.

  16. Ненасыщенные жирные кислоты. Строение, физиологическая роль. Окисление ненасыщенных жирных кислот.

  17. Окисление насыщенных жирных кислот с нечетным количеством атомов углерода.

  18. Пути обмена ацетил-КоА (образование и утилизация).

  19. Кетоновые тела. Строение, биосинтез, окисление, физиологическая роль.

  20. Биосинтез ХС. Реакции, ферменты, регуляция. Физиологическая роль ХС. Нормы ХС в крови.

  21. Пантотеновая кислота. Роль в обмене липидов.

  22. Биосинтез насыщенных жирных кислот. Локализация, механизм, роль АПБ, реакции, ферменты.

  23. Биосинтез триглицеридов. Локализация, механизм, реакции, регуляция.

  24. Биосинтез ФЛ. Роль ФЛ в построении мембран.

  25. Гормональная регуляция липидного обмена.

  26. Интеграция углеводного и липидного обмена (пути образования и использования общих метаболитов).

  27. Жироуглеводный цикл Рэндла. Его механизм и физиологическая роль.

  28. Нарушение переваривания и всасывания липидов. Причина, механизм, последствия.

  29. Роль печени в липидном обмене.

  30. Жировая инфильтрация и дегенерация печени. Причины, механизм. Развитие инфильтрации. Роль незаменимых факторов в питании.

  31. Ожирение. Причина, механизм возникновения.

  32. Возникновение кетонурии и кетонемии. Механизм и причины.

  33. Нормы ХС в крови. Причины гиперхолестеринемии.

  34. Атеросклероз как полиэтиологическое заболевание. Теории, объясняющие развитие атеросклероза.

  35. Риск-факторы в развитии атеросклероза. Коэффициент атерогенности.

  36. Гиперлипопротеидемии как частный случай дислипопротеидемий. Типы ГЛП.

  37. Липидозы.

  38. Перекисное окисление мембран липидов. Механизм возникновения.

  39. ПОЛ. Реакции, метаболиты. Биологическое значение в норме и при патологии.

  40. Антиоксидантная защита от ПОЛ (см. тему «Биологическое окисление»).



Занятие 17

Итоговое (зачетное) за семестр

  1. ^ Биохимия белков и нуклеиновых кислот


Занятие 18

Переваривание и всасывание белков.
Анализ желудочного сока.



Цель занятия: сформировать представления о пищевой ценности белков, молекулярных механизмах их переваривания и всасывания в желудочно-кишечном тракте, путях формирования пула свободных аминокислот тканей и жидкостей организма. Освоить методы определения кислотности и патологических компонентов желудочного сока.


Исходный уровень знаний и навыков


Студент должен знать:

  1. Строение, классификацию и свойства основных классов аминокислот.

  2. Уровни структурной организации белковой молекулы.

  3. Механизм микросомального окисления.

  4. Механизмы мембранного транспорта веществ.


Студент должен уметь:

  1. Проводить титрационный анализ.

  2. Проводить качественные реакции на кровь и молочную кислоту.


Структура занятия

  1. Теоретическая часть

    1. Роль белков в питании. Полноценные и неполноценные белки. Нормы белка в питании. Заменимые и незаменимые аминокислоты. Азотистый баланс.

    2. Обмен простых белков. Переваривание белков в ЖКТ. Состав и свойства желудочного сока. Значение компонентов сока в переваривании белков (HCl, пепсин, слизь и др.). Характеристика пепсина. Механизмы образования и секреции HCl в желудочном соке. Регуляция секреции HCl (роль гистамина, гастрина, ацетилхолина и др.).

    3. Кишечный сок. Его состав и свойства. Характеристика панкреатических и кишечных ферментов. Механизм активации трипсина, химотрипсина и др.

    4. Значение градиента pH соков ЖКТ в переваривании белков. Механизмы переваривания белков и всасывания аминокислот в ЖКТ.

    5. Медиаторы и гормоны ЖКТ – гистамин, серотонин, секретин, холецистокинин, гастроингибирующий пептид, соматостатин, глюкагон, энкефалины и др.

    6. Гниение белков в толстом кишечнике. Обезвреживание продуктов гниения в печени.

    7. Эндогенный пул аминокислот в тканях – пути формирования и утилизации.




  1. Практическая часть

    1. Решение задач.

    2. Проведение повторного инструктажа по технике безопасности.

    3. Лабораторные работы.


Задачи

  1. Какие соединения являются незаменимыми факторами питания:

а) тре; б) гомоцистеин; в) фолиевая кислота; г) цис; д) креатин; е) холин?

  1. Какие аминокислоты являются заменимыми в питании человека:

а) лиз; б) фен; в) тир; г) тре; д) про; е) вал?

  1. Глутатион не содержит:

а) тре; б) сер; в) глу; г) гли; д) мет; е) цис?

  1. Животные белки являются более полноценными по сравнению с растительными, потому что:

а) в животных гликопротеидах содержатся редкие углеводы;

б) в них больше содержится сер и гли;

в) животные белки больше адсорбируют микроэлементов;

г) среднее содержание три и лиз в животных белках выше;

д) отличаются более высокой усвояемостью;

е) животные белки больше адсорбируют витаминов группы B?

  1. Какие аминокислоты способны поддерживать у здорового человека азотистый баланс:

а) тре; б) тир; в) фен; г) ала; д) сер; е) глу; ж) лиз; з) цис; и) вал?

  1. Какие ферменты являются более важными для переваривания белков:

а) энтерокиназа; б) карбоксипептидаза; в) гистидин аммиак-лиаза; г) пепсин; д) химотрипсин; е) трипсин; ж) эластаза ; з) амилаза; к) карбангидраза?

  1. Какие соединения будут инициировать выделение кишечником гастрина:

а) этанол; б) пищевые жиры; в) глюкоза; г) белок; д) секретин; е) NaCl?

  1. В чем причина снижения продукции HCl при гиповитаминозе B1:

а) повышенное образование ацетилхолина;

б) пониженное образование и ускоренный гидролиз ацетилхолина;

в) торможение декарбоксилазных реакций;

г) снижение активности ферментов -окисления;

д) нарушение транспорта O2;

е) усиленная секреция электролитов?

  1. Механизм активации протеаз ЖКТ включает:

а) фосфорилирование проферментов;

б) ограниченный протеолиз;

в) гидроксилирование;

г) оптимум pH;

д) формирование оптимальной среды электролитов;

е) активацию кофакторами?

  1. Каков азотистый баланс у человека, если с пищей поступило 80 г белка за час, а с мочой за это время выделилось 16 г азота?

1   2   3   4   5   6   7   8   9

Поиск по сайту:



База данных защищена авторским правом ©dogend.ru 2014
При копировании материала укажите ссылку
обратиться к администрации
Уроки, справочники, рефераты